生理上，β人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)是妊娠期间胎盘分泌的异二聚体糖蛋白。它由α 亚单位和β亚单位组成，后者不仅能与hCG受体结合，还能与黄体生成素受体结合调控性激素的合成和生殖过程。β-hCG是诊断和监测妊娠滋养细胞疾病和一些生殖细胞肿瘤非常敏感的标记物。然而，近期的许多研究报道在血清、尿或肿瘤组织中升高的β-hCG表达与许多非滋养细胞肿瘤的发生有关。高水平β-hCG的表达通常标志着疾病进展，预示耐药和不良预后。已有研究证实β-hCG能够促进肿瘤细胞增殖，抑制肿瘤细胞凋亡。对卵巢癌而言，尽管已有研究发现卵巢癌组织β-hCG及其受体的表达升高，β-hCG在卵巢癌发生中的具体作用仍不明确。β-hCG的扩增是卵巢癌的病因还是卵巢癌发展后的结果仍不清楚。本文的目的是研究β-hCG在卵巢癌发生中的作用及其机制。
 
    结果
 
    1．β-hCG作为癌基因从低分化浆液性卵巢癌的cDNA表达库中被筛选出来为筛选原发性卵巢癌最常见的转化癌基因，我们从10例低分化浆液性卵巢癌组织中构建cDNA逆转录病毒表达库。将其感染NIH3T3细胞，并接种在软琼脂中，独立的克隆被挑出，并测序。在被分析的193个克隆中，11个是β-hCG基因。提示β-hCG的表达与卵巢癌有关。于是，我们进一步调查β-hCG在卵巢癌发生发展中的作用。
    2． β-hCG的过度表达促进永生化的卵巢表面上皮细胞在体外增殖和贴壁不依赖性生长为明确β-hCG在卵巢癌发生发展中作用，我们通过逆转录病毒载体将β-hCG cDNA转染入两株永生化的、但非恶性的卵巢表面上皮细胞T29和T80中，产生了T29 β-hCG和T80 β-hCG两株细胞。 Western blot的结果显示转染β-hCG cDNA后，β-hCG 的表达明显增加（见图1A）。如图1B-C所示，T29 β-hCG 和T80 β-hCG 细胞的增殖能力（MTT方法计算细胞增殖）和克隆形成率（软琼脂培养）明显高于父系T29和T80细胞，统计学差异显著，均 P< 0.05。这些结果表明，β-hCG促进卵巢上皮细胞在体外的增殖和贴壁不依赖性生长。
    3．β-hCG的过度表达诱导永生化的卵巢表面上皮细胞发生恶性转化随后我们调查β-hCG的过度表达对体内细胞生长的影响。3 × 106个T29, T80, T29 β-hCG 和T80 β-hCG 细胞被接种于裸鼠皮下。如图2A-B所示，经过13周的观察，5只接种了T29细胞和5只接种了T80细胞的裸鼠无肿瘤生长。然而，接种了T29 β-hCG细胞的3只裸鼠和接种了T80 β-hCG细胞的3只裸鼠均有肿瘤生长。HE染色显示T29 β-hCG 和T80 β-hCG皮下异体移植肿瘤为低分化癌组织。免疫组化分析（SP法）证实T80 β-hCG皮下异体移植肿瘤的细胞膜和细胞浆呈现β-hCG抗体的强阳性染色T80 β-hCG肿瘤血管呈现高密度CD34染色（图2 C）。这些结果表明，β-hCG的过度表达诱导永生化的卵巢表面上皮细胞发生恶性转化。
    4. β-hCG的过度表达改变了转导细胞的细胞周期并抑制细胞凋亡我们使用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。 结果显示，与T29和T80 细胞相比，T29 β-hCG 和T80 β-hCG细胞G0/G1期细胞群减少，S期细胞群增加。T29、T80、T29 β-hCG 和T80 β-hCG的细胞凋亡数分12.3％、9.2％、2.9％和3.1％。β-hCG的表达明显地减少了凋亡细胞的数量。这些结果说明，β-hCG通过调控细胞周期和抗凋亡的机制诱导卵巢表面上皮细胞发生恶性转化
 
    讨论
 
    本研究首先发现β-hCG作为癌基因从低分化浆液性卵巢癌cDNA表达库中筛选出来。进一步研究揭示β-hCG的过度表达促进永生化的卵巢表面上皮细胞在体外增殖和贴壁不依赖性生长。体内试验证明，β-hCG基因的转入导致卵巢上皮癌的发生。我们提供了因果证据证明β-hCG能够诱导卵巢上皮细胞发生恶性转化。更重要地是，我们发现β-hCG通过调控细胞周期和抗凋亡的机制诱导卵巢表面上皮细胞发生恶性转化。
    已有文献报道卵巢癌表达β-hCG和/或其受体。Nowak-Markwitz1等报道使用原位RT-PCR的方法，在8例卵巢上皮癌中均检测到β-hCG mRNA 的表达及分布。Jankowska A 等使用RT-PCR和免疫组化的方法分析β-hCG及其受体在卵巢癌、子宫内膜癌和宫颈癌中的表达，发现hCG及其受体均在妇科非滋养细胞恶性肿瘤中高表达，并提出β-hCG及其受体的表达与肿瘤生长自分泌和旁分泌式调控有关。这些报道与我们的结果均说明β-hCG的表达与卵巢癌的发生发展有关。
    另有文献报道β-hCG介导的恶性转化的机制。Hudelist G等提出β-hCG可能通过促进有丝分裂介导人类细胞的恶性转化。Jankowska A 等发现沉默宫颈癌细胞的β-hCG基因后，细胞凋亡加，并认为β-hCG可能成为治疗宫颈癌的有前景的靶基因。Kuorelahti A等报道，在β-hCG转基因鼠肺小叶发育过程中出现Wnt基因的异常表达，并提出β-hCG诱导的乳腺癌与Wnt基因的异常调控有关(19)。Rulli SB等报道β-hCG可能通过卵巢分泌的激素促进肺小叶的发育和乳腺癌的发生。但是，β-hCG诱导卵巢癌发生的机制未见报道。我们的研究清楚地显示，β-hCG通过调控细胞周期和抗凋亡的机制诱导卵巢表面上皮细胞发生恶性转化。进一步的研究将致力于β-hCG及其受体在卵巢上皮癌中诊断和治疗中的价值。