【摘要】　目的：探讨th1／th2比率变化与子痫前期相互关系。方法：采用流式细胞技术分别检测15例正常妊娠孕妇(正常妊娠组)和40例子痫前期患者(子痫前期组)外周血和蜕膜组织中的Th1、Th2及Th1／Th2细胞比率，同时测定其肝、肾功能。结果：①子痫前期组Th1细胞、Th1／Th2比率明显高于正常妊娠组(P<0.01)；②外周血Th1／Th2比率与蜕膜Th1／Th2比率间呈显著正相关(r=0.818，P<0.O1)；③Th1细胞、Thl／Th2比率与肝、肾功能损害呈正相关，且随病情的严重程度有升高趋势。结论：子痫前期患者局部的Th1／Th2比率平衡被打乱，Thl／Th2比率改变可能是其发病的重要原因，在一定程度上也反映了病情的轻重。

【关键词】　子痫前期；辅助性T淋巴细胞l／辅助性T淋巴细胞2；相关性

　　子痫前期(preeclampsia，PE)是妊娠期所特有的疾病，是导致孕产妇及围生儿死亡率升高的主要原因之一，其病因及发病机制至今未明。近年，Thl／Th2细胞比例的改变与妊娠期高血压疾病的关系引起学者的注意，对于子痫前期的大量研究提示，Thl／Th2平衡倾向于1型免疫反应[1] ，这在我们的前期实验也已经证明[2] 。本实验进一步地对Thl／Th2比率平衡与子痫前期相关性进行研究以便为子痫前期发病机制的探讨提供一个新思路，为子痫前期的免疫治疗提供新的方法。

1　资料与方法

1.1　资料来源　对象选择：①实验组：选取2004年2月至2007年2月在河北医科大学附属第二医院及石家庄市第一医院产科剖宫产分娩的子痫前期患者40例(子痫前期组)，诊断按乐杰主编《妇产科学》第7版[3](其中轻度子痫前期20例、重度子痫前期20例)。②对照组：同期住院选择性剖宫产分娩的正常孕妇l5例(正常妊娠组)。两组孕妇均为初产妇，均无近期感染证据，血糖正常，无慢性高血压，无反复流产史，未经生殖助孕技术治疗，无免疫性疾病，未经免疫药物治疗。两组在年龄上差异无统计学意义(P>0.05)。子痫前期组分娩孕周、平均动脉压(MAP)、新生儿体重与正常妊娠妇女组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
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1.2　方法

1.2.1　实验试剂　淋巴细胞分离液购自中国恒信化学试剂有限公司，刺激剂Phorbor 12-myristate 13-acetate(PMA)、Lonomycin、Breferdin A(BFA)由美国Sigma公司提供，打孔剂FIX&PERM购自美国Caltag公司，PerCP-CD4、FITC-IFN-γ、PE-IL-4、FITC—CD69均购自美国Becton-Dickinson公司。

1.2.2　 血标本采集　抽取两组实验对象空腹肘静脉血0.5ml(均于治疗前抽血)，注入肝素无菌管中8小时内送流式检验Thl、Th2细胞百分比。

1.2.3 　蜕膜取材及单个核细胞的分离[4] 　两组孕妇于剖宫产术中，取子宫蜕膜4g，制备单细胞悬液，细胞活性在95％以上。8小时内送流式检验Thl、Th2细胞百分比。

1.2.4　 流式法检测Thl、Th2细胞百分比　取肝素抗凝血0.5ml加等量RPMI-1640培养液稀释后(或0.5ml淋巴细胞悬液)，加入刺激剂，孵育4小时。取收获细胞，加入抗体、打孔剂，用流式细胞仪测定，计数10000个CD4+淋巴细胞中，分泌细胞因子IFN-γ的Thl细胞和分泌细胞因子IL-4的Th2细胞所占的百分比。

1.3　统计学方法应用　SPSS12.0统计软件进行统计，结果以±s表示。外周血及蜕膜组织中的数据行配对设计t检验及Pearson相关分析。

2　结果

2.1 两组外周血、蜕膜Thl、Th2细胞百分比及Thl／Th2情况比较 在外周血与蜕膜组织中均显示：子痫前期组Thl1细胞高于正常妊娠组(P<0.01)，子痫前期组间差异有统计学意义(P<0.05)。子痫前期组Th2细胞低于正常妊娠组(P<0.05)，子痫前期组间差异无统计学意义(P>0.05)。子痫前期组Thl／Th2比率高于正常妊娠组(P<0.O1)，子痫前期组问差异有统计学意义(P<0.05)。子痫前期组以及轻度、重度中蜕膜组织的Thl细胞与Thl／Th2比率均高于其在外周血(P<0.01)。蜕膜组织中Thl／Th2比率与外周血Thl／Th2比率之问存在着显著正相关关系(r=0.818，P<0.01)。其他详见表2。

2.2 两组血小板、肝、肾功能指标 子痫前期组的血小板、肝、肾功能与正常妊娠组相比较，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)；重度子痫前期组尿素氮、尿酸、尿蛋白均高于轻度子痫前期组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

2.3 Thl、Th2与Thl／Th2细胞比率与血小板计数、肝、肾功能指标相关性分析 外周血Thl细胞与收缩压、舒张压、平均动脉压、肌酐、尿酸、尿蛋白的改变均成正相关，差异有统计学意义；蜕膜Thl细胞与收缩压：舒张压、平均动脉压、AST、肌酐、尿酸、尿蛋白的改变均成正相关，差异有统计学意义，与血小板计数成负相关外， 与其他各项病情指标成正相关， 差异均有统计学意义。见表 4{NextPage}

3　讨论

　　在人类细胞免疫系统中，T细胞可以被分为Thl细胞和Th2细胞。两者区分的依据是其不同的细胞因子分泌谱，其中Thl细胞主要分泌IL-2(白细胞介素2)、IFN-γ(干扰素-γ')、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)，诱导细胞毒性反应，而Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等，诱导免疫营养或防护[1] 。机体处于正常状态时，Thl和Th2细胞数量及功能处于动态平衡，维持正常的细胞免疫和体液免疫功能状态。Thl、Th2细胞和细胞因子之间是相互作用、相互调节、又相互抑制的，Thl／Th2比率的平衡决定着机体的免疫状态。对于妊娠而言，主要是其各自浓度和比率的变化，而并非哪一类因子的绝对增加或减少。当Thl／Th2细胞比率处于不平衡状态时，机体功能发生改变，表现出一系列的病理症状。{NextPage}

3.1 　Thl／Th2细胞比率与妊娠　正常妊娠过程中，母体能通过自身的免疫调节系统进行正常的免疫调节，实现母儿免疫耐受，有效制约母体对胎儿产生的排斥反应，正常妊娠是一种“Th2现象”[5] ，即妊娠期母体是趋向于Th2细胞参与的体液免疫，而避免Thl细胞参与的细胞免疫，妊娠期Thl／Th2平衡向rh2漂移并建立新的平衡[6] ，胚胎通过表达具有胚胎保护作用的Th2型细胞因子并降调对胚胎有害的Thl型细胞因子而保护胚胎自身。蜕膜组织产生的免疫因子有助于胎盘的生长和发育[7]，使整个妊娠过程顺利完成，若免疫系统发生紊乱，则导致妊娠失败及某些妊娠并发症的发生。与子痫前期患者比较，本研究中正常妊娠组的Thl／Th2比率平衡倾向于Th2型免疫反应，有利于妊娠的维持。这与以前学者[8]的研究相一致。

3.2　Thl／Th2比率与子痫前期　子痫前期时，胎母间免疫平衡失调，防护反映减弱，CD4+细胞因子占优势，母体免疫反应增强，子痫前期患者出现类似肾移植排斥反应中的纤维素样坏死及急性动脉粥样硬化表现，由此引起血管内皮损伤，进而导致子痫前期一系列临床症状[9] 。患者蜕膜局部淋巴细胞也存在，Thl型优势反应，而且血清中Thl型细胞因子浓度显著升高，这将导致蜕膜局部的NK细胞和细胞毒性T细胞大量激活，激活的NK细胞和细胞毒性T细胞可以攻击浸润的滋养细胞，导致胎盘血管重铸障碍，引发子痫前期。本研究结果显示：子痫前期患者外周血中的Thl／Th2比率显著高于正常妊娠组，表明了在子痫前期患者体内确实存在着Thl／Th2比率失衡，而且蜕膜组织中Thl／Th2比率明显高于外周血Thl／Th2比率，二者成正相关，蜕膜组织中的Thl／Th2比率更为严重的不平衡在一定程度上反映了子痫前期患者的局部细胞免疫功能的变化，可能是其发病机制的关键之一，从细胞因子平衡角度来看，子痫前期是一种免疫调节程序的障碍，其主导的Thl型免疫反应阻碍了患者对胎儿异己抗原的免疫耐受。

3.3 　Thl／Th2比率失衡与子痫前期病情的关系　子痫前期时是一种“Thl偏移现象”，在体内异常增加的Thl型细胞因子可促使中性粒细胞黏附在血管内皮上，促进血管内皮细胞损伤，并通过内皮系统作用进一步增加中性白细胞的活性，造成血管内皮细胞形态改变，细胞膜及细胞器损害等，并增加内皮细胞单层结构通透眭，使内皮细胞间隙增大，微血管通透性增加致组织水肿。由于内皮细胞功能的紊乱，释放血管收缩因子，导致血压升高。由于子痫前期患者肾小球人球小动脉存在着免疫性损伤，并且这种损伤程度与临床病情轻重相关。本研究结果显示：Thl／Th2比率与平均动脉压、肝、肾功能的损害呈正相关，与血小板计数成负相关，表明了子痫前期患者体内的Thl／Th2平衡倾向于Thl，随着病情严重程度的增加，这种倾向的程度有增加趋势，这与魏军等[10]报道相符。尿蛋白的存在就意味着肾脏的损伤，Thl／Th2平衡与此息息相关。可见，子痫前期患者体内蜕膜组织的Thl型免疫反应，最终将导致肾小球内皮细胞损伤，通透性改变等肾功能损害，严重时甚至发生衰竭。子痫前期患者由于存在着Thl／Th2平衡向Thl型免疫反应的倾向[2] ，以及由此引起其他活性因子失控性分泌，导致血管内皮细胞损伤、肾小球黏附及通透性改变，肝脏功能受损，发生高血压、蛋白尿等一系列病理生理改变，最终发展为各脏器的损伤。因此，测定Thl／Th2比率对了解子痫前期患者肝、肾功能损害的程度具有一定的临床意义，或许可作为子痫前期的病情监测指标。

　　总之，子痫前期患者体内确实存在着Thl／Th2免疫细胞不平衡，其向Thl型免疫反应的倾向程度与病情可能成正相关。母胎界面的局部免疫失调，可能影H向了子痫前期孕妇孕晚期蜕膜中的免疫调节。然而，Thl／Th2细胞的变化是与病因学机制有关还是仅仅为其一种副现象，导致其不平衡的关键是什么，这些还有待于进一步研究，以便为子痫前期的病因学研究及其防治提供理论依据。{NextPage}

参  考  文  献

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