【编者按】在全球范围内，子宫内膜癌（EC）是第二常见的妇科恶性肿瘤，其精准治疗因缺乏有效的预测模型而面临挑战。患者来源的类器官（PDOs）能够重现肿瘤异质性和微环境，为药物敏感性测试和个体化治疗提供了革命性的平台。然而，关于EC类器官（ECOs）的标准化建立、生物样本库构建及临床转化，目前仍缺乏共识。


近期，中华医学会研究型医院学会妇产科学专业委员会在Gynecology and Obstetrics Clinical Medicine（GOCM）期刊2026年第1期上，发表了题为Expert consensus on the establishment and clinical application of patient-derived endometrial cancer organoids《患者来源的子宫内膜癌类器官的建立与临床应用专家共识》。该共识由同济大学附属上海市第十人民医院、北京大学人民医院、南昌大学江西医学院、复旦大学附属妇产科医院、苏州生物基因生物技术有限公司器官芯片技术研究所、上海市第十人民医院等多家顶尖机构的专家团队共同制定，旨在为ECOs的标准化建立、质量控制、生物样本库管理及临床转化应用提供权威指导，加速类器官模型融入子宫内膜癌精准医疗的进程。


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图片来源：潘荣玲


核心摘要

本共识系统阐述了ECOs从样本获取、标准化培养、质量验证到生物样本库建立及临床转化应用的全流程技术规范。共识指出，ECOs的成功建立需要严格的预处理流程、标准化的操作程序以及多层次的生物学保真度验证。通过构建标准化的ECOs生物样本库，并应用于高通量药物筛选、肿瘤发生机制研究及肿瘤微环境建模，ECOs有望成为推动子宫内膜癌精准治疗的关键工具。共识还展望了血管化类器官、免疫共培养系统及人工智能整合等未来发展方向。


一、子宫内膜癌类器官的标准化建立


ECOs的建立是一个多步骤的精密过程，其成功依赖于从样本获取到培养验证的每一个环节的标准化。


1.样本获取与运输

✦伦理与合规：所有操作必须符合中国《生物安全法》和《人类遗传资源管理条例》，并获得患者书面知情同意，样本需进行去标识化处理。

✦组织要求：应使用无菌器械从手术切除或活检标本中获取，避免坏死或非肿瘤区域。最小推荐组织体积为5 mm³。

✦运输与处理：组织需立即置于无菌运输缓冲液中，在2°C~8°C的冷链条件下运输，并在采集后2~4小时内开始处理，全程应在48小时内完成。


2.类器官构建与培养流程

✦组织解离：在无菌条件下进行机械剪碎和酶消化（胶原酶、dispase、胰蛋白酶等），直至获得单细胞悬液。

✦细胞收集与计数：消化后细胞需经过洗涤和过滤。细胞活力应≥90%，且收获细胞数需超过10个。

✦培养体系：将细胞嵌入基质胶（Matrigel）或置于无血清、低吸附悬浮液中培养。使用成分明确的培养基（如添加B27、N2、EGF、Noggin、R-spondin1的DMEM/F12），并在低氧条件（5%O₂，5%CO₂，37°C）下孵育。

✦传代与冻存：当类器官直径达到100~200 µm（通常每1~2周）时需进行传代。对于生物样本库，类器官应在-80°C（短期）或液氮（长期）中冻存。


3.质量验证标准



4.成功的ECOs建立必须满足以下三项核心标准：

形态学：原代培养在1~2周内能形成直径超过50 µm的类器官。

代谢活性：传代后第6天的代谢活性（通过CCK-8/Alamar Blue检测）需显著高于第3天。

可扩增性：能够连续扩增≥3代，且在传代和冻存复苏后保持形态一致性。


二、生物学保真度验证：确保与源肿瘤一致


为确保ECOs能真实反映患者肿瘤的特性，必须进行多层次验证：

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目前研究数据显示，ECOs与源肿瘤在微卫星状态上的一致性率达93.33%，在分子分型上的一致性率达86.67%。


三、ECOs生物样本库的建立与管理


标准化、规模化的ECOs生物样本库是推动研究和临床转化的基础设施。

✦建设要求：需包含无菌操作区、恒温培养区、超低温存储区（液氮罐/-80°C冰箱）、质量控制实验室及全流程样本追踪与数据管理系统。

✦样本分类：应根据WHO/TCGA标准，将子宫内膜癌类器官按分子亚型（POLEmut，MMRd，NSMP，p53abn）进行分层存储，确保覆盖病理学和分子谱系的多样性。

✦数据共享：应建立集中的生物样本库信息管理系统，同步临床元数据、分子谱系等。数据管理与共享需严格遵守中国关于人类遗传资源的相关法规，并鼓励遵循FAIR原则存入国家认可的数据库。


四、ECOs的转化应用：从基础研究到临床


1.个性化药物敏感性分析与高通量筛选


2.ECOs是进行药物敏感性评估的理想平台。共识推荐，在标准治疗方案失败、缺乏既定方案的罕见或难治性恶性肿瘤等临床场景下，可考虑使用类器官药物敏感性测试来指导治疗。


✦筛选平台：可采用自动化设备和微孔板技术进行高通量筛选。

✦操作流程：将ECOs消化为单细胞或小簇，以500~2000个细胞/孔的密度接种于96或384孔板，待类器官结构重建后，加入不同浓度的药物。

✦结果分析：使用CCK-8、ATP检测等方法量化药物敏感性，计算抑制率并绘制剂量反应曲线。


3.子宫内膜癌发生机制与关键信号通路研究


4.ECOs保留了肿瘤的异质性和微环境复杂性，是研究致癌机制和关键信号通路的强大工具。例如，利用CRISPR基因编辑技术创建突变模型，或通过共培养系统整合基质细胞、免疫细胞，可以模拟复杂的肿瘤微环境并研究细胞间相互作用。


5.未来展望与挑战

✦技术融合：将类器官药物筛选数据与临床患者资料通过生物信息学和人工智能整合，可开发精准预测模型。

✦模型升级：建立免疫共培养系统和血管化类器官平台，对于克服现有模型在模拟肿瘤微环境方面的功能限制至关重要。

✦标准化与规模化：需要利用3D生物打印、人工智能驱动的质量控制等新兴技术，实现可扩展、可重复的类器官模型生产。


结论


本共识是中国首部关于子宫内膜癌类器官标准化建立与临床转化的英文专家共识。它系统规划了从实验室建立到临床应用的完整路径，强调了标准化操作、多层次验证和伦理合规的重要性。通过构建高质量的ECOs模型及其生物样本库，并应用于药物筛选、机制研究和微环境模拟，有望极大推动子宫内膜癌的精准治疗发展。尽管在血管化、免疫微环境模拟等方面仍面临挑战，但通过跨学科合作与技术迭代，类器官技术必将为攻克子宫内膜癌提供前所未有的有力工具。


作者简介：

本文共识由陈晓军、王建六、程雅丽、程媛、赵冰、倪超等权威专家牵头，汇集了中华医学会研究型医院学会妇产科学专业委员会及中国细胞生物学学会的多学科专家团队共同制定。


编译：潘荣玲


原文链接：

https://doi.org/10.1136/gocm-2025-000351


引用格式：

Cheng Y, Cheng Y, Zhao B, Ni C, Chen X, Wang J. Expert consensus on the establishment and clinical application of patient-derived endometrial cancer organoids. Gynecology and Obstetrics Clinical Medicine. 2026;6:e000351. https://doi.org/10.1136/gocm-2025-000351